RNAprep Pure Micro Kit
Caratteristiche
■ Capace di purificà l'ARN di alta qualità da campioni di traccia, cume u tessutu micro-dissecatu, u tessutu fibrosu è e cellule.
■ DNase I Unica minimizeghja a contaminazione di DNA genomicu.
■ L'ARN di alta purezza è prontu à aduprà hè adattatu per l'applicazioni sensibili in aval.
■ Nisuna estrazione di fenol / cloroformu, nè precipitazione di LiCl è etanolu, ùn ci hè bisognu di centrifugazione à gradiente CsCl, chì face u prucessu sicuru è affidabile.
Applicazioni
■ RT-PCR.
■ Northern Blot, Dot Blot.
■ PCR in tempu reale.
■ Analisi di chip.
■ Screening PolyA, traduzzione in vitro, analisi di prutezzione RNase è clonazione moleculare.
Tutti i prudutti ponu esse persunalizati per ODM / OEM. Per i dettagli,per piacè cliccate Serviziu persunalizatu (ODM / OEM)
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RNA Totale di 1 × 106, 1 × 105, 1 × 104, 1 × 103, 1 × 102, 10 cellule Hela sò state estratte aduprendu RNAprep Pure Micro Kit. RT-qPCR hè statu realizatu cù Quant qRT-PCR (SYBR Green) Kit di TIANGEN. |
A-1 Lisi cellulare o omogeneizazione ùn basta
---- Riduce l'usu di campioni, aumentate a quantità di tampone di lisi, aumentate l'omogeneizazione è u tempu di lisi.
A-2 A quantità di campione hè troppu grande
---- Riduce a quantità di campione adupratu o cresce a quantità di tampone di lisi.
A-1 Lisi o omogeneizazione di cellule insufficienti
---- Riduce l'usu di campioni, aumentate a quantità di tampone di lisi, aumentate l'omogeneizazione è u tempu di lisi.
A-2 A quantità di campione hè troppu grande
---- Per piacè riferitevi à a capacità massima di trasfurmazione.
A-3 RNA ùn hè micca eluitu cumpletamente da a colonna
---- Dopu avè aghjuntu acqua RNase-Free, lasciate qualchì minutu prima di centrifugà.
A-4 Etanolu in l'eluente
---- Dopu u lavatu, centrifugate di novu è caccià u tampone di lavatu u più pussibule.
A-5 U mezu di cultura cellulare ùn hè micca cumpletamente eliminatu
---- Quandu si raccoglie e cellule, assicuratevi di rimuovere u mezu di cultura u più pussibule.
A-6 E cellule immagazzinate in RNAstore ùn sò micca centrifugate in modu efficace
---- A densità di RNAstore hè più grande chì u mediu mediu di cultura cellulare; dunque a forza centrifugale deve esse aumentata. Hè suggeritu di centrifugà à 3000x g.
A-7 Basso contenutu di RNA è abbondanza in u campione
---- Aduprate un campione pusitivu per determinà se u bassu rendimentu hè causatu da u campione.
A-1 U materiale ùn hè micca frescu
---- I tessuti freschi devenu esse conservati in azotu liquidu immediatamente o immediatamente messi in u reagente RNAstore per assicurà l'effettu di l'estrazione.
A-2 A quantità di campione hè troppu grande
---- Riduce a quantità di campione.
A-3 RNase contaminazionen
---- Ancu se u buffer furnitu in u kit ùn cuntene RNase, hè faciule di cuntaminà RNase durante u prucessu di estrazione è deve esse trattatu cun cura.
A-4 Inquinamentu da elettroforesi
---- Sostituite u buffer di elettroforesi è assicuratevi chì i consumabili è u Buffer di Caricamentu sò liberi di cuntaminazione RNase.
A-5 Troppu caricu per l'elettroforesi
---- Riduce a quantità di carica di campioni, a carica di ogni pozzu ùn deve supera i 2 μg.
A-1 A quantità di campione hè troppu grande
---- Riduce a quantità di campione.
A-2 Alcuni campioni anu un elevatu cuntenutu di DNA è ponu esse trattati cù DNase.
---- Eseguite u trattamentu DNase senza RNase à a soluzione RNA ottenuta, è l'ARN pò esse direttamente usatu per sperimenti successivi dopu u trattamentu, o pò esse ulteriormente purificatu da kit di purificazione RNA.
Per vetri, cottu à 150 ° C per 4 ore. Per contenitori di plastica, immersi in 0,5 M NaOH per 10 min, poi accuratamente risciacquati con acqua priva di RNase e poi sterilizzati per rimuovere completamente RNase. I reagenti o e soluzioni aduprate in l'esperimentu, in particulare l'acqua, devenu esse liberi di RNase. Aduprate acqua senza RNase per tutti i preparati di reagenti (aghjunghjite acqua à una buttiglia di vetru pulita, aghjunghjite DEPC à una concentrazione finale di 0,1% (V / V), scuzzulate a notte è autoclave).
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