Reagent Universale TRNzol
Caratteristiche
■ Alta flessibilità: Gamma salvatica di volume di campione iniziale, adatta per l'estrazione di campione di grande volume in una sola reazione.
■ Rendimentu altu: Metudu di precipitazione maximizeghja u rendiment di RNA in campione.
■ Usu largu: Adatta per parechji campioni sfarenti cum'è tessuti vegetali è animali, cellule cultivate, sangue, fluidi corporei, ecc.
■ Operazione rapida: U DNA Genomicu pò esse uttenutu in 1 ora ..
Specificazione
Type: Basatu di precipitazione
Campione: Virus, batteri, funghi, animali, tessuti vegetali, cellule cultivate è fluidi corporei.
Ughjettivu: ARN
Tempu di operazione: ~ 1 ora
Applicazioni: U reagente Universale TRNzol minimizza a contaminazione di impurità cum'è DNA è proteine in u RNA totale purificatu, è pò esse adupratu direttamente per vari esperimenti di biologia moleculare cume Northern Blot, Dot Blot, PolyA screening, traduzzione in vitro, analisi di prutezzione RNase, costruzione di biblioteche cDNA , RT-PCR, PCR in tempu reale è sequenziazione à altu flussu.
Tutti i prudutti ponu esse persunalizati per ODM / OEM. Per i dettagli,per piacè cliccate Serviziu persunalizatu (ODM / OEM)
Metudu: 30 mg di tessutu di fegatu di topu, 100 mg di foglie di risu sò stati raccolti da macinazione di azotu liquidu; 1 × 106E cellule cultivate HepG2 è 700 μl di mezu di cultura Saccharomyces Cerevisiae (OD600 = 0,9) sò stati raccolti per centrifugazione. 1 ml di Reagente Universale TRNzol da TIANGEN è i prudutti pertinenti da u fornitore L è T sò stati aghjunti à ogni aliquota di campione è l'estrazione di RNA hè stata effettuata seguendu i protocolli furniti da ogni fornitore. U volumu di eluzione era 80 μl, 50 μl, 30 μl è 30 μl per i quattru campioni rispettivamente. 3 μl di eluatu hè statu caricatu per corsia.
MIII: TIANGEN Marker III;
L'elettroforesi hè stata cundutta à 6 V / cm per 30 min nantu à un 1% agarose.
Risultati: U Reagente Universale TIANGEN TRNzol pò estrà RNA di alta purezza è bona integrità da fegatu di topu, foglie di risu, cellule cultivate è campioni di lievito, cun alta efficienza. A qualità RNA hè paragunabile o ligeramente superiore à quella di i prudutti L è T.
A-1 Lisi cellulare o omogeneizazione ùn basta
---- Riduce l'usu di campioni, aumentate a quantità di tampone di lisi, aumentate l'omogeneizazione è u tempu di lisi.
A-2 A quantità di campione hè troppu grande
---- Riduce a quantità di campione adupratu o cresce a quantità di tampone di lisi.
A-1 Lisi o omogeneizazione di cellule insufficienti
---- Riduce l'usu di campioni, aumentate a quantità di tampone di lisi, aumentate l'omogeneizazione è u tempu di lisi.
A-2 A quantità di campione hè troppu grande
---- Per piacè riferitevi à a capacità massima di trasfurmazione.
A-3 RNA ùn hè micca eluitu cumpletamente da a colonna
---- Dopu avè aghjuntu acqua RNase-Free, lasciate qualchì minutu prima di centrifugà.
A-4 Etanolu in l'eluente
---- Dopu u lavatu, centrifugate di novu è caccià u tampone di lavatu u più pussibule.
A-5 U mezu di cultura cellulare ùn hè micca cumpletamente eliminatu
---- Quandu si raccoglie e cellule, assicuratevi di rimuovere u mezu di cultura u più pussibule.
A-6 E cellule immagazzinate in RNAstore ùn sò micca centrifugate in modu efficace
---- A densità di RNAstore hè più grande chì u mediu mediu di cultura cellulare; dunque a forza centrifugale deve esse aumentata. Hè suggeritu di centrifugà à 3000x g.
A-7 Basso contenutu di RNA è abbondanza in u campione
---- Aduprate un campione pusitivu per determinà se u bassu rendimentu hè causatu da u campione.
A-1 U materiale ùn hè micca frescu
---- I tessuti freschi devenu esse conservati in azotu liquidu immediatamente o immediatamente messi in u reagente RNAstore per assicurà l'effettu di l'estrazione.
A-2 A quantità di campione hè troppu grande
---- Riduce a quantità di campione.
A-3 RNase contaminazionen
---- Ancu se u buffer furnitu in u kit ùn cuntene RNase, hè faciule di cuntaminà RNase durante u prucessu di estrazione è deve esse trattatu cun cura.
A-4 Inquinamentu da elettroforesi
---- Sostituite u buffer di elettroforesi è assicuratevi chì i consumabili è u Buffer di Caricamentu sò liberi di cuntaminazione RNase.
A-5 Troppu caricu per l'elettroforesi
---- Riduce a quantità di carica di campioni, a carica di ogni pozzu ùn deve supera i 2 μg.
A-1 A quantità di campione hè troppu grande
---- Riduce a quantità di campione.
A-2 Alcuni campioni anu un elevatu cuntenutu di DNA è ponu esse trattati cù DNase.
---- Eseguite u trattamentu DNase senza RNase à a soluzione RNA ottenuta, è l'ARN pò esse direttamente usatu per sperimenti successivi dopu u trattamentu, o pò esse ulteriormente purificatu da kit di purificazione RNA.
Per vetri, cottu à 150 ° C per 4 ore. Per contenitori di plastica, immersi in 0,5 M NaOH per 10 min, poi accuratamente risciacquati con acqua priva di RNase e poi sterilizzati per rimuovere completamente RNase. I reagenti o e soluzioni aduprate in l'esperimentu, in particulare l'acqua, devenu esse liberi di RNase. Aduprate acqua senza RNase per tutti i preparati di reagenti (aghjunghjite acqua à una buttiglia di vetru pulita, aghjunghjite DEPC à una concentrazione finale di 0,1% (V / V), scuzzulate a notte è autoclave).
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